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冰冻切片,免疫组化,检测GFP,丙酮是否有影响?

2017-05-25
你说做GFP的检测。
GFP本身就是发光的啊,直接检测就行了,不需要做IF或者IHC啊。担心丙酮固定有影响,可以试试多聚甲醛4%。
真是想用丙酮的话,可以试试吗,看看结果跟你的预想的差别多大。
此外,不用担心淬灭,实在不行,直接用抗GFP的抗体检测,可以用其他的颜色的光,比如红色的荧光二抗。

直接看荧光显微镜,在共聚焦下看过了,也不能区分是否是自发荧光,现在买了抗GFP的抗体,想通过组化来检测组织中是否有GFP。
你的意思是把冰冻组化过程中用丙酮的部分替换成PFA就行了吗?
不用担心淬灭,是指即使用丙酮,荧光淬灭了,也可以用抗体检测到吗?