ELISA试剂盒的蛋白质局部浓缩
ELISA试剂盒蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。
为您详解样品的各步操作方法:
A、细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
B、血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测,1000×g离心30分钟去除颗粒。
C、血清:操作过程中避免任何细胞刺激,使用不含热原的试管,收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
D、组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎,1000×g离心10分钟,取上清液。
E、保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻,尽可能的不要使用溶血或高血脂血,如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤,不要在37℃或更高的温度加热解冻,应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
可用作ELISA试剂盒测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、ELISA试剂盒收缩后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。