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教您如何提取胎牛血清白蛋白

2017-10-31

教您如何提取胎牛血清白蛋白

胎牛血清白蛋白(BSA),是胎牛血清中的一种球蛋白,一般提取胎牛血清白蛋白,经常使用的方法是加热法。在今天的技术咨询中,为您主要介绍方法步骤及所需材料。下面一起来看看是如何提取胎牛血清白蛋白的!
 一、所需材料         
    胎牛血清取近郊屠宰场,以柠檬酸三钠为抗凝剂,血液采集后随即分离出血浆备用。需要的试剂有血清白蛋白;溴甲酚氯;醋酸纤维素薄膜,其余试剂均为分析纯。提取胎牛血清白蛋白需要准备 LG-6型大容量冷冻离心机,DF-C型电泳仪,UV-754型紫外可见分光光度计,PHS-2型酸度计。 
 二、具体方法        
    白蛋白含量测定 采用溴甲酚氯法,以胎牛血清白蛋白为标准. 白蛋白纯度的测定 采用醋酸纤维素薄膜电泳法。吸光度值的测定 用分光光度计直接测定蛋白质溶液在波长为403 nm处的光吸收值,然后折算成浓度为10 g/L时牛血清白蛋白的光吸收值,用A403表示。 
             
    胎牛血清白蛋白的生产工艺 新鲜抗凝牛血用LC-6型大容量离心机(3 000 r/min×30 min)离心分离出血浆,加一定量的蒸馏水稀释,再加入适当的稳定剂和蛋白沉淀剂,然后按下述方法进行实验处理: 
   1.不同pH值溶液对白蛋白的收率和质量的影响 在其它条件固定的情况下,试验不同pH值对白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。
  2.不同加热保温时间对白蛋白的收率和质量的影响 在选定的pH值和其它条件固定的情况下,试验不同加热保温时间对白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。 
  3.不同稀释倍数对白蛋白的收率和质量的影响 在选定的pH值和保温时间及其它条件固定的情况下,试验不同稀释倍数对白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。
  4.不同加热温度对白蛋白的收率和质量的影响 在其它条件选定的情况下,试验不同加热温度对白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。