细菌质体需藉转形 （transformation） 技术

细菌质体需藉由转形 （transformation） 的技术，将的引介入细菌体中，藉由寄主细菌的系统达成复制或进基因表现的目的。寄主细菌的选择，须视质体的种类及实验的目的而定。本实验的目的在建构一个表现质体，使的能在大肠杆菌中大表现 GUS。蛋白

然而，用大肠杆菌进外源基因的表现时，常遇到的问题是，外源基因的产物会对寄主细菌造成伤害；此外，持续断的表现外源基因也会使寄主细菌生长减慢或无法生长。因此，必须有适当的调控机制控制外源基因的表现。蛋白 我们所用的载体pQE31 在T5 promoter与外源基因插入地址的间，具有一段lac operon中的lacO序，可用lac repressor结合其上调控T5 promoter的启动，只有在inducer （如IPTG） 加入时，才会启动转录的进，而lac repressor的源则必须靠寄主提供。

由于此质体为multiple copies，一般大肠杆菌菌株中lac repressor的含足以有效地进调控，纵使未加入inducer，也会有外源蛋白质的表现，万一外源蛋白质对寄主造成毒害，使的无法生长，我们可能表现质体无法选殖到，无法达成我们的实验目的。 我们所选用的寄主菌株JM109 所具有的 lacIq，能够过表现 （overproduce） lac repressor，因此可较有效地控制T5 promoter的启动。 然而，是JM109 这一类带有lacIq的菌株发生问题时，就必须再换其它的寄主菌株；如M15[pREP4]，此菌株除染色体上的lacI基因外，还带有能持续表现lacrepressor的质体，应可解决lac repressor 足的问题。