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Raw264.7-LUC-GFP-PURO细胞
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细胞名称 | Raw264.7-LUC-GFP-Puro双标记的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 |
货 号 | KL-C2247M-LG |
组织来源 | 成年雄性BALB/c小鼠,Abelson鼠白血病病毒诱导的肿瘤,腹水 |
细胞形态 | 单核细胞/巨噬细胞 |
生长方式 | 贴壁生长 |
描 述 | 该细胞株建自Abelson小鼠白血病病毒诱发的肿瘤组织,是科研上最常用的炎症细胞模型之一。该细胞易于增殖,高效DNA转染力,对RNA干扰敏感,常用作转染宿主细胞和复制小鼠诺如病毒。该细胞表面sIg-、Ia-、Thy-1.2抗原阴性。据报道,该细胞建系后已不分泌且检测不到病毒颗粒,XC斑点形成实验阴性。可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞,LPS或PPD处理2天后可诱导分解红血球但对肿瘤靶细胞无作用。经检测鼠痘病毒阴性。 |
构建信息 | Raw264.7-LUC-GFP-Puro细胞为慢病毒感染Raw264.7细胞得到的稳定表达萤火虫荧光素酶和GFP的细胞系。 |
培养条件 | DMEM高糖(含丙酮酸钠),10%FBS;空气95%,二氧化碳5%;37℃培养 |
换液频率 | 2-3天 |
传代周期 | 3-5天 |
传代比例 | 1:6-1:10 |
冻存液配方 | 70%基础培养基,20%FBS,10% DMSO |
安全性 | BSL-2 |
供应限制 | 仅供研究之用。 |
细胞操作详细步骤
--悬浮细胞
1.细胞复苏
1.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记,预热好的细胞完全培养基,一支15ml离心管,离心管中加入4-5ml细胞完全培养基。
1.2取出细胞冻存管,在37度水浴中快速解冻,将管子擦干消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.3将细胞悬液转移到加有培养基的离心管中,1000转离心5分钟。
1.4倒掉上清,加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
1.5将重悬好的细胞转移到T25细胞培养瓶,补充培养基到5ml左右,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养。
2.细胞传代
第一种方法:
2.1细胞密度达到2×106细胞/ml时,1000转离心5分钟收集细胞,弃上清,加入新鲜培养基,使细胞密度在1-3×105细胞/ml.
第二种方法:
2.2细胞密度达到2×106细胞/ml时,将培养瓶中的细胞悬液分装到新的培养瓶,并补充新鲜培养基,使细胞密度在1-3×105细胞/ml.
3.细胞冻存
将培养瓶中的细胞悬液转移到离心管中,1000转离心5分钟收集细胞,弃上清,加入冻存液,重悬细胞,并分装到冻存管,冻存密度1-2×106细胞/ml。将冻存管放入程序降温盒,并放到-80℃冰箱,过夜后将冻存管转移到液氮保存。
4.注意事项
4.1建议收到细胞后先用我们配套的培养基和血清。收到活细胞的客户培养瓶中的培养基可回收使用,保存在4度可使用一周。
4.2不同实验室操作上会有些许差异,为了避免细胞不适应,请先按照说明书推荐的方法和操作步骤培养,待细胞冻存后可根据自己的习惯操作看细胞是否能够适应。
4.3建议收到细胞后,前几代及时冻存一些细胞,并最好是可以多冻存几个批次。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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