NCI-H460 [H460]人大细胞肺癌细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

NCI-H460 [H460]人大细胞肺癌细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

NCI-H460 [H460]人大细胞肺癌细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

NCI-H460 [H460]人大细胞肺癌细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KLC3035 绒猴EBV转化的白细胞 B95-8

KLC3036 负鼠肾细胞 OK

KLC3037 狗肾细胞 MDCK(NBL-2)

KLC3038 狗肾细胞 Super Tube

KLC3039 鸡胚成纤维细胞 UMNSAH/DF-1

KLC3040 狗肾恶性组织细胞增生症细胞 DH82

KLC3041 猫肾细胞 CRFK

KLC3042 猫肾细胞 F81

KLC3043 牛胚气管细胞 EBTr (NBL-4)

KLC3044 牛肾细胞 MDBK (NBL-1)

KLC3045 袋鼠肾细胞 Pt K1 (NBL-3)

KLC3046 猪髋动脉内皮细胞 PIEC

KLC3047 小鼠胚胎细胞 NIH/3T3

小鼠胚胎细胞 NIH/3T3

KLC3048 小鼠胚胎成纤维细胞 3T6-Swiss albino

KLC3049 小鼠胚胎成纤维细胞 BALB/3T3 clone A31

KLC3050 小鼠胚胎成纤维细胞 C3H/10T1/2, Clone 8

KLC3051 小鼠胚胎成纤维细胞 Psi2 DAP

KLC3052 小鼠成肌细胞 C2C12

KLC3053 小鼠皮下结缔组织细胞 A9

KLC3054 小鼠皮下结缔组织细胞 L Wnt-3A

KLC3055 小鼠成纤维细胞 NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]

KLC3056 小鼠黑色素瘤细胞 B16

KLC3057 小鼠皮肤黑色素瘤细胞 B16-F10

KLC3058 小鼠胃癌细胞 MFC

KLC3059 小鼠胚胎肝细胞 BNL CL.2

KLC3060 小鼠胰岛内皮细胞 MS1

KLC3061 小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞 Beta-TC-6

KLC3062 小鼠结肠癌细胞 CT26.WT

KLC3063 小鼠骨肉瘤成骨细胞 K7M2 wt [K7M2-WT]

KLC3064 小鼠肝癌细胞 Hepa 1-6

KLC3065 小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14 MC3T3-E1 Subclone 14

KLC3066 小鼠骨髓基质细胞 OP9

KLC3067 小鼠肾腺癌细胞 RAG