HEp-2人喉表皮样癌细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

HEp-2人喉表皮样癌细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

HEp-2人喉表皮样癌细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

HEp-2人喉表皮样癌细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KLC3296 人舌鳞癌细胞 Tca-8113

KLC3297 人脑神经胶质瘤细胞 U-373MG

KLC3298 人肝癌细胞 Hep3B

KLC3299 人正常肝细胞 HL-7702

KLC3300 小鼠单核细胞白血病细胞 Raw-Blue

KLC3301 人胚肾细胞 293-mTLR5 

KLC3302 人骨髓瘤细胞 U266

KLC3303 人膀胱癌细胞 EJ

KLC3304 肝卵圆细胞 HOC 

KLC3305 人舌鳞癌细胞 CAL 27

KLC3306 人食管癌细胞 Eca-109

KLC3307 小鼠Lewis肺癌细胞 LLC1[LL/2]

KLC3308 人肺癌细胞 PC9

KLC3309 人肺癌细胞 PC14

KLC3310 人脐静脉内皮细胞 HUVEC[HUV-EC-C]

KLC3311 DADY

KLC3312 昆虫卵巢细胞 Sf9

KLC3313 大鼠乳腺癌细胞 MADB-106

KLC3314 猪肾上皮细胞 PK（15）

KLC3315 狗肾上皮细胞 MDCK[NBL-2]

KLC3316 猪肺泡巨噬细胞 3D4/21

KLC3317 猴胚胎肾上皮细胞 marc-145

KLC3318 人冠状动脉内皮细胞 HCAEC

KLC3319 猪骨髓间质干细胞 Pig MSC

KLC3320 R5

KLC3321 S8

KLC3322 Panc O2

KLC3323 人非小细胞肺癌细胞 H322

KLC3324 人鼻咽癌细胞 CNE

KLC3325 人食管癌细胞 EC9706

KLC3326 人胚肾细胞--用于慢病毒包装 293LVT

KLC3327 人非小细胞肺癌细胞 H1650-M3