NK-92人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

NK-92人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

NK-92人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

NK-92人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KL-pc-h140 神经少突起前质胶质细胞 Neural glial cell precursorssmall protrusions

KL-pc-h141 神经星形胶质细胞 Neural astrocytes cells

KL-pc-h142 神经小胶质细胞 Neural microglia cells

KL-pc-h143 脑微血管内皮细胞 Brain microvascular endothelialcells

KL-pc-h144 脑成纤维细胞

KL-pc-h145 小脑颗粒细胞 Cerebellar granule cells

KL-pc-h146 *上皮细胞 Corneal epithelial cells

KL-pc-h147 视网膜微血管内皮细胞 Retinal microvascularendothelial cells

KL-pc-h148 角膜成纤维细胞 Corneal fibroblasts

KL-pc-h149 脉络膜微血管细胞 Choroidal cells

KL-pc-h150 牙周膜成纤维细胞 Periodontal ligament fibroblasts

KL-pc-h151 人晶状体上皮细胞

KL-pc-h152 人角膜内皮细胞

KL-pc-h153 人视网膜色素上皮细胞

KL-pc-h154 人小梁网细胞

KL-pc-h155 人视网膜muller 细胞

大鼠原代细胞

KL-pc-r001 肺微血管内皮细胞 Pulmonary microvascularendothelial cells

KL-pc-r002 肺血管平滑肌细胞 Pulmonary vascular smooth musclecells

KL-pc-r003 Ⅱ型肺泡上皮细胞 Type Ⅱ alveolar epithelialcells

KL-pc-r004 气管上皮细胞 Tracheal epithelial cells

KL-pc-r005 气道平滑肌细胞 Airway smooth muscle cells

KL-pc-r006 肺成纤维细胞 Pulmonary fibroblastscells

KL-pc-r007 支气管上皮细胞 Tracheal epithelial cells

KL-pc-r008 支气管成纤维细胞 Tracheal fibroblasts cells

KL-pc-r009 肺大静脉平滑肌细胞 Pulmonary vein smooth musclecells

KL-pc-r010 肺大动脉平滑肌细胞 Aorta smooth muscle cell lung

KL-pc-r011 肺大动脉内皮细胞 Aorta epithelial cells

KL-pc-r012 肺动脉成纤维细胞 Aorta fibroblasts cells