CCD-1095Sk人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

CCD-1095Sk人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

CCD-1095Sk人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

CCD-1095Sk人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KL-pc-r013 肺大静脉内皮细胞 Pulmonary vein epithelial cells

KL-pc-r014 气管和支气管上皮细胞 Tracheal and bronchialepithelial cells

KL-pc-r015 心肌细胞（成年） Myocardial cells

KL-pc-r016 心脏纤维原细胞 Cardiac fibroblasts

KL-pc-r017 主动脉内皮细胞 Aortic endothelial cells

KL-pc-r018 主动脉平滑肌细胞 Aortic smooth muscle cells

KL-pc-r019 大隐静脉平滑肌细胞 SaKLenous vein smooth musclecells

KL-pc-r020 冠状动脉平滑肌细胞 Coronary artery smooth musclecells

KL-pc-r021 大隐静脉内皮细胞 SaKLenous vein endothelial cells

KL-pc-r022 冠状动脉内皮细胞 Coronary artery endothelialcells

KL-pc-r023 大鼠心肌细胞(成年)

KL-pc-r024 大鼠心肌细胞(新生大鼠)

KL-pc-r025 大鼠血管外膜成纤维细胞

KL-pc-r026 食管上皮细胞 EsoKLageal epithelial cells

KL-pc-r027 食管平滑肌细胞细胞 EsoKLageal smooth muscle cellsof the cell

KL-pc-r028 肠平滑肌细胞 Intestinal smooth muscle cells

KL-pc-r029 肠粘膜上皮细胞 Intestinal mucosa epithelialcells

KL-pc-r030 肠动脉内皮细胞 Im artery endothelial cells

KL-pc-r031 肠静脉内皮细胞 Im venous endothelial cells

KL-pc-r032 肝实质细胞 The liver parencKLma cells

KL-pc-r033 肝动脉内皮细胞 Hepatic artery endothelial cells

KL-pc-r034 肝动脉平滑肌细胞 Hepatic artery smooth musclecells

KL-pc-r035 肝内胆管上皮细胞 Intrahepatic biliary epithelialcells

KL-pc-r036 胃粘膜上皮细胞 Gastric epithelial cells

KL-pc-r037 肝窦内皮细胞 Sinusoidal endothelial cells

KL-pc-r038 肝星形细胞 Hepatic stellate cells

KL-pc-r039 直肠平滑肌细胞 Rectal smooth muscle cells

KL-pc-r040 小肠平滑肌细胞 Intestinal smooth muscle cells

KL-pc-r041 结肠平滑肌细胞 Colonic smooth muscle cells

KL-pc-r042 小肠粘膜上皮细胞 Small intestinal epithelialcells

KL-pc-r043 肠微血管细胞 Intestinal microvascular cells

KL-pc-r044 大鼠小肠血管内皮细胞

KL-pc-r045 大鼠小肠隐窝上皮细胞