HCEC角膜上皮细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

HCEC角膜上皮细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

HCEC角膜上皮细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

HCEC角膜上皮细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

HOC1 KL0833 人卵巢癌细胞,HOC1细胞

HO-8910 KL0834 人卵巢癌细胞,HO-8910细胞

EFO-27 KL0835 人卵巢癌细胞,EFO-27细胞

EFO-21 KL0836 人卵巢癌细胞,EFO-21细胞

COV644 KL0837 人卵巢癌细胞,COV644细胞

COV504 KL0838 人卵巢癌细胞,COV504细胞

COV434 KL0839 人卵巢癌细胞,COV434细胞

COV362 KL0840 人卵巢癌细胞,COV362细胞

COLO720E KL0841 人卵巢癌细胞,COLO720E细胞

COLO-704 KL0842 人卵巢癌细胞,COLO-704细胞

COC1 KL0843 人卵巢癌细胞,COC1细胞

CaOV3 KL0844 人卵巢癌细胞,CaOV3细胞

A2780 KL0845 人卵巢癌细胞,A2780细胞

8910PM KL0846 人卵巢癌细胞,8910PM细胞

3AO KL0847 人卵巢癌细胞,3AO细胞

COC1/CDDP KL0848 人卵巢癌顺铂耐药株 COC1/CDDP细胞

CRIC043 KL0849 人卵巢癌 C200细胞, C200

FD6 KL0850 人淋巴细胞与仓鼠肺细胞杂交细胞,FD6细胞

FD4 KL0851 人淋巴细胞与仓鼠肺细胞杂交细胞,FD4细胞

JK(Jurkat)   KL0852 人淋巴细胞瘤细胞,JK(Jurkat)细胞

T2(174×CEM.T2) KL0853 人淋巴母细胞,T2(174×CEM.T2)细胞

CA46 KL0854 人淋巴瘤细胞,CA46细胞

H293T KL0855 人类胚胎*表皮细胞,H293T细胞

KB KL0856 人口腔上皮癌细胞,KB细胞

KB/V KL0857 人口腔上皮癌长春新碱耐药株 KB/V细胞

JRDC033 KL0858 人口腔表皮样癌细胞,KB细胞, KB

KB KL0859 人口腔表皮样癌 KB细胞

HB KL0860 人口腔癌细胞,HB细胞

801-D KL0861 人巨细胞性肺癌细胞,801-D细胞

Mo7e KL0862 人巨细胞白血病细胞株 Mo7e细胞

Dami   KL0863 人巨核细胞保白血病细胞,Dami细胞

JRDC074 KL0864 人晶状体上皮细胞,HLEC细胞, HLEC