K562-HLA-G5表达HLA-G5的K562细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

K562-HLA-G5表达HLA-G5的K562细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

K562-HLA-G5表达HLA-G5的K562细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

K562-HLA-G5表达HLA-G5的K562细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KLTC-axbz-071 大鼠肝星形细胞 CFSC-2G

KLTC-axbz-072 大鼠肝星形细胞 CFSC-3H & 5H

编号 中文 英文名称

KLTC-axbz-073 大鼠肝上皮样干细胞 WB-F344

KLTC-axbz-074 鼠肌原细胞 C2C12

KLTC-axbz-075 大鼠肺上皮Ⅱ型细胞 RLE-6TN

KLTC-axbz-076 小鼠肺成纤维细胞 L929

KLTC-axbz-077 大鼠胸主动脉平滑肌细胞，ATCC：A10 VSMC

KLTC-axbz-078 小鼠胚成纤维包装细胞 PA317

KLTC-axbz-079 小鼠胚成纤维包装细胞 ψ2

KLTC-axbz-080 叙利亚仓鼠肾细胞 BHK-21

KLTC-axbz-081 BHK

KLTC-axbz-082 转S9基因仓鼠卵巢细胞 ZA1

KLTC-axbz-083 转S9基因仓鼠卵巢细胞 ZA6

KLTC-axbz-084 大鼠巨噬细胞 MC

KLTC-axbz-085 非洲绿猴肾细胞 COS-1

KLTC-axbz-086 非洲绿猴肾细胞 COS-6

KLTC-axbz-087 猴肾细胞系 BSC-1

KLTC-axbz-088 小鼠肾小球系膜细胞 MES-13

KLTC-axbz-089 小鼠肾系膜细胞 MC53

KLTC-axbz-090 大鼠肾成纤微细胞 NRK-49F

KLTC-axbz-091 小鼠皮肤细胞 JB6-C30

KLTC-axbz-092 小鼠皮肤细胞 JB6-C41

KLTC-axbz-093 小鼠前成骨细胞 MC-3T3

KLTC-axbz-094 小鼠成骨细胞系 MC3T3-E1

KLTC-axbz-095 鼠胚成骨细胞 3T3-E1

KLTC-axbz-096 大鼠肾小管上皮细胞，ATCC：CRL-6509 NRK

KLTC-axbz-097 大鼠肾细胞 NRK-52E

KLTC-axbz-098 小鼠饲养层上皮细胞 HPT-8

KLTC-axbz-099 LLC:Leuwis肺癌细胞

KLTC-axbz-100 化学转化小鼠鼻咽上皮细胞 TMNE

KLTC-axbz-101 大鼠鼻咽癌细胞 FAT

KLTC-axbz-102 小鼠大肠癌细胞 CT-26.WT

KLTC-axbz-103 小鼠结肠癌细胞 CMT93

KLTC-axbz-104 大鼠埀体瘤细胞 GH3