GSB-E草鱼鱼鳔上皮样细胞系完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

GSB-E草鱼鱼鳔上皮样细胞系冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

GSB-E草鱼鱼鳔上皮样细胞系复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

GSB-E草鱼鱼鳔上皮样细胞系复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KLTC-axbz-105 产EBV的绒猴白细胞 B95-8

编号 中文 英文名称

KLTC-axbz-106 小鼠艾氏腹水瘤细胞TCM15 S180

KLTC-axbz-107 小鼠胚胎成纤维细胞 T6-Swiss albino

KLTC-axbz-108 小鼠皮下结缔组织细胞 A9

KLTC-axbz-109 蚊子细胞 C6/36

KLTC-axbz-110 鼠小脑细胞 C8-D1A

KLTC-axbz-111 猫肾细胞 CRFK

KLTC-axbz-112 猫肾细胞 F81

KLTC-axbz-113 中国仓鼠卵巢细胞 CTLA4 Ig-24

KLTC-axbz-114 非洲绿猴非洲绿猴肾细胞 CV-1

KLTC-axbz-115 牛胚气管细胞 EBTr (NBL-4)

KLTC-axbz-116 恒河猴胚肾细胞 FRhK-4

KLTC-axbz-117 大鼠肝癌细胞 H4-ⅡE

KLTC-axbz-118 大鼠肝细胞瘤 H4-II-E-C3

KLTC-axbz-119 大鼠心肌细胞 H9c2(2-1)

KLTC-axbz-120 大鼠肾小球系膜细胞EC (HBZY－1) HBZY－1

KLTC-axbz-121 绿猴恒河猴肾细胞 LLC-MK2

KLTC-axbz-122 牛肾细胞 MDBK (NBL-1)

KLTC-axbz-123 貂肺上皮细胞 Mv.1.Lu(NBL-7)

KLTC-axbz-124 小鼠脑神经瘤细胞 Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]

KLTC-axbz-125 大鼠肺泡巨噬细胞 NR8383

KLTC-axbz-126 负鼠肾细胞 OK

KLTC-axbz-127 小鼠骨髓瘤细胞 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]

KLTC-axbz-128 小鼠骨髓瘤细胞 P3X63Ag8.653

KLTC-axbz-129 猪髋动脉内皮细胞 PIEC

KLTC-axbz-130 鼠逆转录酶病毒包装细胞 PT67

KLTC-axbz-131 中国仓鼠仓鼠肺细胞 R1610

KLTC-axbz-132 绿猴猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞 RF/6A

KLTC-axbz-133 大鼠雪旺细胞 RSC96

KLTC-axbz-134 猪睾丸细胞系(ST) ST

KLTC-axbz-135 蝙蝠肺细胞 Tb 1 Lu

KLTC-axbz-136 小鼠B细胞杂交瘤细胞 W6/32