PK（15）猪肾细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

PK（15）猪肾细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

PK（15）猪肾细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

PK（15）猪肾细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KLC3466人黑色素细胞--胎儿HEM-f

KLC3467人真皮成纤维细胞--胎儿HDF-f

KLC3468人真皮成纤维细胞--新生HDF-n

KLC3469人真皮成纤维细胞--成人HDF-a

KLC3475

KLC3476毛发细胞系统

KLC3477人毛乳头细胞HHDPC

KLC3478人生发基质细胞HHGMC

KLC3479人毛囊外根鞘细胞HHORSC

KLC3480人毛囊内根鞘细胞HHIRSC

KLC3481人毛囊角质细胞HHFK

KLC3482

KLC3483淋巴细胞系统

KLC3484人淋巴内皮细胞HLEC

KLC3485人淋巴成纤维细胞HLF

KLC3486人扁桃体上皮细胞HTEpiC

KLC3487人扁桃体成纤维细胞HTF

KLC3488人胸腺上皮细胞HTyEpiC

KLC3489人胸腺成纤维细胞HTyF

KLC3490口腔细胞系统

KLC3491人口腔微血管内皮细胞HOMEC

KLC3492人口腔角质细胞HOK

KLC3493人牙龈成纤维细胞HGF

KLC3494人牙周膜成纤维细胞HPLF

KLC3495

KLC3496胃肠细胞系统

KLC3497人食道微血管内皮细胞HEEpiC

KLC3498人食道平滑肌细胞HESMC

KLC3499人食管上皮细胞HEEpiC

KLC3500人食管成纤维细胞HEF