PUMC-mips-B2小鼠诱导性多潜能干细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

PUMC-mips-B2小鼠诱导性多潜能干细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

PUMC-mips-B2小鼠诱导性多潜能干细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

PUMC-mips-B2小鼠诱导性多潜能干细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KL-pc-h103 前列腺上皮细胞 Prostate epithelial cells

KL-pc-h104 胰岛B 细胞 Pancreatic B cells

KL-pc-h105 前列腺平滑肌细胞 Prostatic smooth muscle cells

KL-pc-h106 甲状腺滤泡上皮细胞

KL-pc-h107 *星状细胞

KL-pc-h108 *上皮细胞

KL-pc-h109 脉络膜血管细胞

KL-pc-h110 前列腺成纤维细胞 Prostaticfibroblasts cells

KL-pc-h111 颅盖造骨细胞 Calvaria osteoblasts cells

KL-pc-h112 滑膜细胞 Synovial cells

KL-pc-h113 骨骼肌细胞 Skeletal muscle cells

KL-pc-h114 关节软骨细胞 Articular chondrocytes

KL-pc-h115 椎间盘髓核细胞 Intervertebral disc cells

KL-pc-h116 真皮微血管内皮细胞 Dermal microvascular endothelialcells

KL-pc-h117 真皮淋巴上皮细胞 Dermal lymKLatic epithelialcells

KL-pc-h118 胎儿表皮角化细胞 Fetal epidermal keratinocytes

KL-pc-h119 新生儿表皮角化细胞 Neonatal epidermal keratinocytes

KL-pc-h120 成人表皮角化细胞 Adult epidermal keratinocytes

KL-pc-h121 胎儿真皮成纤维细胞 Fetal dermal fibroblasts

KL-pc-h122 *真皮成纤维细胞 Baby dermal fibroblasts

KL-pc-h123 成人真皮成纤维细胞 Adult dermal fibroblasts

KL-pc-h124 皮下脂肪细胞 Subcutaneous fat cells

KL-pc-h125 内脏脂肪细胞 Visceral fat cells

KL-pc-h126 软骨细胞 Chondrocytes cells

KL-pc-h127 成骨细胞 Osteoblasts cell

KL-pc-h128 表皮角质形成细胞 Epidermal keratinocytes

KL-pc-h129 表皮黑色素细胞

KL-pc-h130 破骨细胞

KL-pc-h131 皮肤肥大细胞

KL-pc-h132 脂肪细胞

KL-pc-h133 前脂肪细胞 Preadipocytes

KL-pc-h134 脑动脉血管内皮细胞 Cerebral artery endothelialcells

KL-pc-h135 脑动脉血管平滑肌细胞 Cerebral artery smooth musclecells