NRK49F正常大鼠肾细胞（EGF受体阳性）完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

NRK49F正常大鼠肾细胞（EGF受体阳性）冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

NRK49F正常大鼠肾细胞（EGF受体阳性）复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

NRK49F正常大鼠肾细胞（EGF受体阳性）复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

CASC026 KL0070 杂交瘤细胞抗AChE AE-1细胞, AE-1

PC 61 5.3 KL0071 杂交瘤细胞CD25 PC 61 5.3 细胞

OKT3 KL0072 杂交瘤(抗CD3) OKT3细胞

KL0073 运动发酵单孢菌 ATCC 29191

TC-jcyj0052 KL0074 圆弧青霉

CRL-1687 KL0075 原位*腺癌细胞,BxPC-3细胞 BxPC-3

KL0076 宇佐美曲霉 ACCC 30339

MV-1-Lu KL0077 鼬肺上皮细胞,MV-1-Lu细胞

CCL-10 KL0078 幼仓鼠肾细胞,BHK细胞 BHK

NP69-SV40T KL0079 永生化鼻咽上皮细胞系 NP69-SV40T细胞

KL0080 荧光威克酵母 ACCC 20058

U2OS-Luc teT-on KL0081 荧光素酶转染人成骨肉瘤细胞,U2OS-Luc teT-on细胞

TC-jcyj0024 KL0082 荧光假单胞菌

TC-jcyj0062 KL0083 *双歧杆菌 ATCC 15697

KL0084 隐甲藻 ATCC30772

TC-jcyj0021 KL0085 阴沟肠杆菌

KL0086 异型酒香酵母 ACCC 20234

KL0087 已型副伤寒沙门氏菌 CMCC(B) 50094

TC-jcyj0045 KL0088 乙型溶血性链球菌

KL0089 乙酸钙不动杆菌 ATCC23055

CRL-1469 KL0090 *癌细胞,PANC-1细胞 PANC-1

TC-jcyj0023 KL0091 洋葱假单胞菌 ATCC 25416

CCL-25 KL0092 羊膜细胞,WISH细胞 WISH

KL0093 烟酸芽孢杆菌 NBRC15566

KL0094 烟曲霉 ACCC 30367

KL0095 亚利桑那沙门氏菌 CMCC(B) 47001

KL0096 熏衣草灰链霉菌 ATCC13306

Ramos KL0097 血细胞瘤细胞系 Ramos细胞

BHK-21 KL0098 叙利亚仓鼠肾细胞,BHK-21细胞

KL0099 许旺酵母变种 CCRC 20332

KL0100 许旺酵母 ACCC 20194

KL0101 休哈塔假丝酵母 ATCC34887