MC/CAR人外周血淋巴细胞系完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

MC/CAR人外周血淋巴细胞系冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

MC/CAR人外周血淋巴细胞系复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

MC/CAR人外周血淋巴细胞系复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

HL-7702 KL0452 人正常肝细胞,HL-7702细胞

HBL-100 KL0453 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞,HBL-100细胞

LGZC004 KL0454 人张氏肝细胞,Chang liver细胞, Chang liver

JRDC009 KL0455 人原位*腺癌细胞,BxPC-3细胞, BxPC-3

BxPc-3-EGFP-puro KL0456 人原位*腺癌细胞,BxPc-3-EGFP-puro细胞

HL-60 KL0457 人原髓细胞白血病细胞,HL-60细胞

AL7P/HL-60R KL0458 人原髓细胞白血病细胞,AL7P/HL-60R细胞

293 Ad5+ KL0459 人原胚肾转化细胞系 293 Ad5+细胞

UT-7 KL0460 人原巨核细胞型白血病细胞,UT-7细胞

HaCaT KL0461 人永生化表皮细胞,HaCaT细胞

LGZC011 KL0462 人永生化鼻咽上皮细胞系 NP69细胞, NP69

HPAC KL0463 人*腺泡上皮癌 HPAC细胞

Panc 10.05 KL0464 人*腺癌细胞,Panc 10.05细胞

AR42J KL0465 人*细胞,AR42J细胞

PL45 KL0466 人*导管腺癌细胞,PL45细胞

SW 1990 KL0467 人*癌细胞系 SW 1990细胞

SFPAC-1 KL0468 人*癌细胞,SFPAC-1细胞

PSN1 KL0469 人*癌细胞,PSN1细胞

PC-3 KL0470 人*癌细胞,PC-3细胞

PC-2 KL0471 人*癌细胞,PC-2细胞

Patu 8988 KL0472 人*癌细胞,Patu 8988细胞

PANC-1 KL0473 人*癌细胞,PANC-1细胞

Panc 10.05 KL0474 人*癌细胞,Panc 10.05细胞

MIApaca-2 KL0475 人*癌细胞,MIApaca-2细胞

KP4 KL0476 人*癌细胞,KP4细胞

KP3 KL0477 人*癌细胞,KP3细胞

KP2 KL0478 人*癌细胞,KP2细胞

KP1 KL0479 人*癌细胞,KP1细胞

JF-305 KL0480 人*癌细胞,JF-305细胞

Human panc28 KL0481 人*癌细胞,Human panc28细胞

Human panc1 KL0482 人*癌细胞,Human panc1细胞

Hs766T KL0483 人*癌细胞,Hs766T细胞