MDBK(BVDV-free)牛肾细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

MDBK(BVDV-free)牛肾细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

MDBK(BVDV-free)牛肾细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

MDBK(BVDV-free)牛肾细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

SW480-EGFP-puro KL0879 人结肠腺癌细胞,SW480-EGFP-puro细胞

SW480 [SW-480] KL0880 人结肠腺癌细胞,SW480 [SW-480]细胞

SW1116 KL0881 人结肠腺癌细胞,SW1116细胞

RKO KL0882 人结肠腺癌细胞,RKO细胞

LS180 KL0883 人结肠腺癌细胞,LS180细胞

LS 174T KL0884 人结肠腺癌细胞,LS 174T细胞

HT-29 KL0885 人结肠腺癌细胞,HT-29细胞

HCT-8 KL0886 人结肠腺癌细胞,HCT-8细胞

CW-2 KL0887 人结肠腺癌细胞,CW-2细胞

CaCo2 KL0888 人结肠腺癌细胞,CaCo2细胞

CASC247 KL0889 人结肠腺癌肺转移细胞,T84细胞,

RKO-E6 KL0890 人结肠癌转基因细胞,RKO-E6细胞

RKO-AS45-1 KL0891 人结肠癌转基因细胞,RKO-AS45-1细胞

HT29 KL0892 人结肠癌细胞株 HT29细胞

RKO KL0893 人结肠癌细胞（低分化）RKO细胞

T84 KL0894 人结肠癌细胞,T84细胞

SW620 KL0895 人结肠癌细胞,SW620细胞

SW620-EGFP-puro KL0896 人结肠癌细胞,SW620-EGFP-puro细胞

SW480 KL0897 人结肠癌细胞,SW480细胞

SW403 KL0898 人结肠癌细胞,SW403细胞

SW1116 KL0899 人结肠癌细胞,SW1116细胞

RKO KL0900 人结肠癌细胞,RKO细胞

Ls-174-T KL0901 人结肠癌细胞,Ls-174-T细胞

LS174T KL0902 人结肠癌细胞,LS174T细胞

LoVo KL0903 人结肠癌细胞,LoVo细胞

LO2 KL0904 人结肠癌细胞,LO2细胞

Human sw620 KL0905 人结肠癌细胞,Human sw620细胞

Human sw480 KL0906 人结肠癌细胞,Human sw480细胞

Human HCT-8 KL0907 人结肠癌细胞,Human HCT-8细胞

HT-29 KL0908 人结肠癌细胞,HT-29细胞

HRT-S1 KL0909 人结肠癌细胞,HRT-S1细胞

HCT8 KL0910 人结肠癌细胞,HCT8细胞