Psp-EFGP-Iprl荷斯坦奶牛胎儿成纤维细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

Psp-EFGP-Iprl荷斯坦奶牛胎儿成纤维细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

Psp-EFGP-Iprl荷斯坦奶牛胎儿成纤维细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

Psp-EFGP-Iprl荷斯坦奶牛胎儿成纤维细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

Calu-1 KL1078 人肺腺癌细胞,Calu-1细胞

A549 KL1079 人肺腺癌细胞,A549细胞

A2 KL1080 人肺腺癌细胞,A2细胞

A549/DDP KL1081 人肺腺癌耐顺铂株 A549/DDP细胞

CRIC008 KL1082 人肺腺癌 D6细胞, D6

Calu-3 KL1083 人肺腺癌 (胸水) Calu-3细胞

HPAEpiC KL1084 人肺泡上皮细胞,HPAEpiC细胞

SK-MES KL1085 人肺鳞癌细胞,SK-MES细胞

CASC226 KL1086 人肺鳞癌细胞,SK-MES-1细胞, SK-MES-1

NCI-H520 KL1087 人肺鳞癌细胞,NCI-H520细胞

LTEP-s KL1088 人肺鳞癌细胞,NCI-H520细胞

LGZC086 KL1089 人肺巨细胞癌细胞,HLamp细胞, HLamp

hLAMP KL1090 人肺巨细胞癌细胞,hLAMP细胞

PG-BE1 KL1091 人肺巨细胞癌(PG）的高转移亚系 PG-BE1细胞

PG-LH7 KL1092 人肺巨细胞癌(PG)的低转移亚系 PG-LH7细胞

PG KL1093 人肺巨细胞癌 PG细胞

HPAEC KL1094 人肺动脉内皮细胞,HPAEC细胞

HLF KL1095 人肺成纤维样细胞,HLF细胞

HFL1 KL1096 人肺成纤维细胞,HFL1细胞

QG-56 KL1097 人肺扁平上皮癌细胞,QG-56细胞

PLC/PRF/5 KL1098 人肺癌亚历山大细胞系 PLC/PRF/5细胞

MSTO-211H KL1099 人肺癌细胞株 MSTO-211H细胞

Calu-6 KL1100 人肺癌细胞系（未分化）Calu-6细胞

Tul-1 KL1101 人肺癌细胞系 Tul-1细胞

NCI-H292 KL1102 人肺癌细胞(淋巴结转移) NCI-H292细胞

PC9 KL1103 人肺癌细胞,PC9细胞

PC9-EGFP-puro KL1104 人肺癌细胞,PC9-EGFP-puro细胞

PC14 KL1105 人肺癌细胞,PC14细胞

NCI-H1975 KL1106 人肺癌细胞,NCI-H1975细胞

JRDC050 KL1107 人肺癌细胞,LECPα-1细胞, LECPα-1 

Human A549 KL1108 人肺癌细胞,Human A549细胞

H125 KL1109 人肺癌细胞,H125细胞

Calu-1 KL1110 人肺癌细胞,Calu-1细胞

A549 KL1111 人肺癌细胞,A549细胞